특정 영역에서의 유전자 편집은 대체로 외부 DNA와 내부 DNA의 상동재조합(homologous recombination)을 통해서 이루어집니다. 이는 마우스 배아줄기세포의 DNA 상동재조합 기술에 기반하고 있으며, DNA 뉴클레아제 기반의 유전자 편집 기술의 출현으로 인하여, ZFN(Zinc Finger Nuclease ) 기술과 최신 CRISPR/Cas9 기술로 진화하였습니다.

ZFN이나 TALEN과 비교하여 CRISPR/Cas9 기술은 보다 효율적이며, 제작 기간 단축, 제작 비용 감소 및 적용될 수 있는 종의 경계를 허무는 등의 장점이 있으며, 환자의 조직에서 직접적으로 유전자를 편집할 수 있게 되는 가능성을 부여하였습니다. 

바이오사이토젠은 CRISPR/Cas9 기반의 혁신적인 EGE™ (Extreme Genome Editing ) 기술을 개발하였으며, 이는 마우스, 랫트, 세포주 등에서 5 kb 이상의 큰 DNA 조각을 기존의 CRISPR/Cas9 기술보다 최대 20배 이상 효율적으로 knock in 할 수 있습니다. EGE™의 성공률은 98%에 달하기 때문에, 유전적으로 편집된 동물과 세포주 모델을 제작하는데 있어서 시간을 최소화 할 수 있습니다.

TechnologyAdvantagesApplicationsTimeline
CRISPR/EGE™-based Gene EditingHigh efficiency; large gene knockout/knockin capabilities; simultaneously targets multiple genes; applicable to many species; easy to construct. Off-target effects can be reduced by choosing the appropriate sgRNA and eliminated by breeding; Southern blot to screen out random insertions.Conventional KO mice/rats6-8 months
Conditional KO mice/rats
ROSA26 locus gene KI mice/rats
Gene KI/ Mutation mice/rats
Humanized mice/rats
Reporter/KO-then-cKO mice/rats
Normal cell lines KO/KI
hESC/iPS cells KO/KI
ESC/HR-based Gene EditingAccurate, precise and reliably established, by far the only targeting technology which can meet the requirements of almost all genome modifications; but ES cells are required (only mouse cells are efficient for this technique), so it cannot be applied to other animal models); time consuming; heavy workload; high costConventional knockout (KO) mice7-11 months
Conditional KO mice
ROSA26 locus gene knockin (KI) mice
Gene KI/ Mutation mice
Humanized mice
Reporter/KO-then-cKO mice
Transgenic TechnologyTraditional transgenic technology is welcomed because the fast timeline low cost, super large fragment insertion, etc. But as the advance of new gene targeting technologies, especially EGE™, above advantages are not very obvious anymore. Especially random insertion, instability, large number founders can cost more time and money sometimesTransgenic mice/rats2-3 months for F0
Chromosome EngineeringGene cluster replacement at the scale of megabase. A unique technology for specific applications such as antibody gene cluster humanization.MouseUpon request
Others ServicesBesides the full-scale gene editing services, Biocytogen also provide milestone services relating with gene editing.CRISPR plasmid construction; CRISPR activity assay; Donor plasmid constructionUpon request


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