우리는 C57BL/6, Balb/c, DBA2, NOD-scid 등을 포함한 여러가지 품종의 마우스들을 유전자 편집 과정을 거쳐 질환모델로서 제작하고 있습니다. 마우스 모델 제작에는 CRISPR/CAS9 기반 EGE™ 혹은 배아줄기세포 기반 유전자 편집 기술이 적용되며, 각각 대략적으로 6~8개월, 9~12개월의 제작기간이 소요됩니다. 마우스는 짧은 생애주기와 인간과의 유전적 유사성으로 인해 자주 사용되고 선호되는 포유류 모델입니다. 특히, 인간화 마우스의 잠재력은 대단합니다. 또한 마우스는 유전형, 표현형 등 다방면에서 가장 많이 연구된 포유류 모델입니다.

품종 : 실험용 마우스 품종에는 outbred와 inbred 두가지가 있습니다. Outbred 마우스는 최대한의 유전적 이질성을 유지하기 위하여 교배되며, inbred 마우스는 이와 반대로 최대한의 유전적 동질성을 유지하기 위하여 교배됩니다. Inbred 품종은 유전형이 서로 거의 동일한 마우스들끼리 장기 교배하여 얻어지는 특정 품종입니다. Inbred 품종은 2촌 이내에서 적어도 20회 이상의 교배를 통하여 얻어지며, 98.6% 이상의 유전적 동질성을 가지게 되며, 각각은 동일한 클론으로서 취급될 수 있습니다. C57BL/6(N and J), BALB/c, Fvb, A/J, C3H, CBA, DBA/2는 대표적인 inbred 마우스 품종입니다.

CRISPR/EGE™ 혹은 ESC/HR: 바이오사이토젠에서는 85%의 마우스와 100%의 랫트의 유전자 편집 프로젝트에 대하여 EGE™ 기술을 사용합니다. 비록 EGE™ 기술이 배아줄기세포 기반 프로젝트에 비하여 비용도 적게 들고, 제작 기간도 더 빠르지만, knockin 사이즈가 15kb보다 크다면, ESC/HR 기술을 사용해야할 필요성이 있습니다.

과다배란: 과다배란은 1980년대 후반부터 트랜스제닉 마우스의 생산에 적용되었으며, 한정된 숫자의 암컷 마우스에서 많은 수의 생식세포 배란을 인공적으로 증대시키는  기술입니다. 

교배: 교배는 유전적으로 편집된 마우스 모델 제작에 있어서 가장 중요한 요소 중 하나입니다. 적합한 교배 환경을 위해서는 넓은 사육 공간을 제공하는 것과 마우스 모델 제작 시간을 단축하는 것이 중요합니다. 바이오사이토젠의 AAALAC인증을 받은 SPF 동물 사육 시설은 최적의 교배 환경을 제공합니다. 우리의 전문가들이 가장 효율적인 교배 계획을 수립하여 고객님의 비용과 시간을 절약해드릴 것 입니다.

CRISPR Knockin 마우스의 적용 예시:

인간화 CD3ε 마우스 모델의 제작 및 검증

유전자 편집 전략

Mouse-Targeting-Strategy1.png

mRNA 발현 분석 

B-hCD3ε 마우스 유전자 RT-PCR 결과 : 호모 B-hCD3ε 마우스에서 분리한 비장 세포에서 hCD3ε mRNA 가 검출되었습니다.

 mRNA-Expression-Analysis-22.png

단백질 발현 분석

WT(wild-type) C57BL/6 마우스와 homozygous B-hCD3ε 마우스에서 각각 얻은 비장 세포를 FACS를 이용하여 분석하였습니다.

결과: WT C57BL/6 마우스에서는 마우스의 CD3+ 세포들이 검출되었고, 호모 B-hCD3ε 마우스에서는 인간 CD3+ 세포들이 검출되었습니다.

123.png

단일 면역관문 인간화 마우스

일반명 제품 번호 마우스 백그라운드
B-hBTLA mice 110005 C57BL/6
B-hCD27 Mice 110006 C57BL/6
B-hCD28 Mice 110007 C57BL/6
B-hCD3E Mice 110008 C57BL/6
B-hCD40 Mice 110009 C57BL/6
B-hCD47 (C) Mice 110615 BALB/c
B-hCD47 Mice 110010 C57BL/6
B-hCTLA4 Mice 110011 C57BL/6
B-hHAVCR2 (TIM3) Mice 110018 C57BL/6
B-hLAG3 Mice 110013 C57BL/6
B-hPD-1 mice Plus 110019 C57BL/6
B-hPD-1 Mice 110003 C57BL/6
B-hPD-L1 Mice 110015 C57BL/6
B-hSIRPA Mice 110016 C57BL/6
B-hTIGIT Mice 110017 C57BL/6
B-hTNFR2 Mice 110032 C57BL/6
B-hTNFRSF18 (GITR) Mice 110012 C57BL/6
B-hTNFRSF4 (OX40) Mice 110014 C57BL/6
B-hTNFRSF9 (4-1BB) Mice 110004 C57BL/6
B-hOX40L mice 110043 C57BL/6
B-hSIGLEC15 mice 110121 C57BL/6
B-hCD73 mice 110027 C57BL/6
B-hCD38 mice 110046 C57BL/6
B-HLA-A2.1 mice 110110 C57BL/6
B-hLAG3 mice plus 110025 C57BL/6
B-hCD39 mice 110792 C57BL/6
B-hB7-H3 mice 110028 C57BL/6
B-hTLR8 mice 110104 C57BL/6

이중 면역관문 인간화 마우스

일반명 제품 번호 마우스 백그라운드
B-hCTLA4/h4-1BB Mice 120539 C57BL/6
B-hCTLA4/hLAG3 Mice 120529 C57BL/6
B-hCTLA4/hOX40 Mice 120531 C57BL/6
B-hCTLA4/hTIM3 Mice 120530 C57BL/6
B-hOX40/h4-1BB Mice 120527 C57BL/6
B-hPD-1/hPD-L1 Mice 120522 C57BL/6
B-hPD-1/h4-1BB Mice 120516 C57BL/6
B-hPD-1/hBTLA Mice 120517 C57BL/6
B-hPD-1/hCD27 Mice 120518 C57BL/6
B-hPD-1/hCD40 Mice 120526 C57BL/6
B-hPD-1/hCTLA4 Mice 120519 C57BL/6
B-hPD-1/hGITR Mice 120528 C57BL/6
B-hPD-1/hLAG3 Mice 120520 C57BL/6
B-hPD-1/hOX40 Mice 120521 C57BL/6
B-hPD-1/hTIGIT Mice 120523 C57BL/6
B-hPD-1/hTIM3 Mice 120524 C57BL/6
B-hPD-L1/h4-1BB Mice 120535 C57BL/6
B-hPD-L1/hCD27 Mice 120537 C57BL/6
B-hPD-L1/hCD40 Mice 120536 C57BL/6
B-hPD-L1/hCTLA4 Mice 120538 C57BL/6
B-hPD-L1/hLAG3 Mice 120533 C57BL/6
B-hPD-L1/hOX40 Mice 120534 C57BL/6
B-hPD-L1/hTIGIT Mice 120532 C57BL/6
B-hPD-L1/hTIM3 Mice 120540 C57BL/6
B-hSIRPa/hCD47 Mice 120525 C57BL/6
B-hCD94/hNKG2A mice 121077 C57BL/6
B-hCTLA4/hGITR mice 120962 C57BL/6

삼중 면역관문 인간화 마우스

일반명 제품 번호 마우스 백그라운드
B-hPD-1/hPD-L1/hCTLA4 mice 130571 C57BL/6
B-hPD-1/hPD-L1/hTIM3 mice 130574 C57BL/6
B-hPD-1/hSIRPA/hCD47 mice 130562 C57BL/6
B-hPD-L1/hSIRPA/hCD47 mice 130561 C57BL/6
B-hPD-1/hPD-L1/hTNFR2 mice 130849 C57BL/6
B-hPD-1/hPD-L1/hTIGIT mice 130573 C57BL/6
B-hPD-1/hPD-L1/hLAG3(plus) mice 130572 C57BL/6
B-hPD-1/hPD-L1/h4-1BB mice 130569 C57BL/6
B-hPD1/hLAG3/hTIM3 mice 130999 C57BL/6

4중 면역관문 인간화 마우스

일반명 제품 번호 마우스 백그라운드
B-hPD-1/hPD-L1/hSIRPA/hCD47 mice 140577 C57BL/6

기타 인간화 마우스

일반명 제품 번호 마우스 백그라운드
B-hCCR2 mice 110097 C57BL/6
B-hFcRn mice 110001 C57BL/6
B-hCSF1R mice 110035 C57BL/6
B-hTLR9 mice 110103 C57BL/6
B-hCCR4 mice 110098 C57BL/6
B-hC5AR1 mice 110078 C57BL/6
B-hCCR8 mice 110096 C57BL/6

Cre 마우스

일반명 제품 번호 활용 영역
B-ALB-CreERT2 Mice 110137 Alb promoter-driven inducible Cre mouse model (liver)
B-CAG-tdTomato cKI Mice 110148 Cre-induced tdTomato expression for Cre expression profile detection
B-CD150-iCreERT2 Mice 110142 Cre-induced tdTomato expression for Cre expression profile detection
B-Col10a1-iCre Mice 110122 Col10a1 promoter-driven Cre mouse model (mature hypertrophic chondrocyte)
B-Col2a1-iCre Mice 110123 Col2 promoter-driven Cre mouse model (type II collencyte)
B-Dmp1-iCre Mice 110124 Dmp1 promoter-driven Cre mouse model (skeleton)
B-Grpr-iCre Mice 110125 Grpr promoter-driven Cre mouse model (digestive system, nervous system)
B-Ins1-iCreERT2 Mice 110126 Ins1 promoter-driven inducible Cre mouse model (pancreas isletbeta cell)
B- Nkp46-iCre mice 110127 Ncr1 promoter-driven Cre mouse model (NK cell)
B-Oxr1-iCreERT2 Mice 110128 Oxr1 promoter-driven inducible Cre mouse model (frontal lobe adult, cerebellum adult and 24 other tissues)
B-Pdgfrb-iCre Mice 110129 Pdgfrb promoter-driven inducible Cre mouse model (parietal cell of multiple organs, such as skin, intestinal tract, kidney, lung and plexus vasculosus around central nervous system)
B-Prrx1-iCre Mice 110130 Prrx1 promoter-driven Cre mouse model (mesenchyme)
B-Sp7 (Osx)-iCre Mice 110131 Syn1promoter-driven inducible Cre mouse model (brain)
B-Tnfrsf11a (RANK)-iCre Mice B-EM-009 Tnfrsf11a promoter-driven Cre mouse model (lymph gland formation and osteoclast differentiation system)
B-Ucp1-iCre Mice 110134 UCP1 promoter-driven Cre mouse model (mitochondria, brown fat)
B-Zeb1-iCreERT2 Mice 110135 Zeb1 promoter-driven inducible Cre mouse model (tunica media of artery and myocardial cell)
B-Sp7-iCre mice 110131 Sp7 promoter-driven Cre mouse model (skeleton)
B-Tcf21-iCreERT2 mice 110141 Tcf21 promoter-driven inducible Cre mouse model (bladder, lung)
B-Gfap-iCre mice 110144 Gfappromoter-driven Cre mouse model. (Astroglia)

기타 유전자 변형 마우스모형.

일반명 제품 번호 활용 영역
B-Apoe-KO Mice 110168 Hyperlipidemia, atherosclerosis mice model (Cardiovascular system)
B-F8 KO Mice 110169 Hemophilia mice model
B-F9 KO Mice 110170 Hemophilia mice model
B-Il17a-EGFP Mice 110161 IL17 expression and functional test (gene reporter mice)
B-Il17a-Gluc Mice 110162 IL17 expression and functional test (gene reporter mice)
B-db/db Mice 110171 Diabetes mice model
B-ob/ob Mice 110172 Diabetes mice model
B-p53 KO Mice 110167 Tumorigenesis drug test
B-Tgfb1 cKO mice 110164 Study on transforming growth factor

B-NDG마우스

일반명 제품 번호
B-NDG 마우스 110586

B-NDG 기반 마우스 모델

일반명 제품 번호 마우스 백그라운드
B-NDG HLA-A2.1 mice 110599 B-NDG
B-NDG B2m KO mice plus 110601 B-NDG
B-NDG Kitw-v mice 110588 B-NDG
B-NDG hIL6 mice 110596 B-NDG
B-NDG hTHPO mice 110590 B-NDG
B-NDG hIL15 mice 110600 B-NDG
B-NDG hSIRPA mice 110003 B-NDG

단일 사이토카인 인간화 마우스

일반명 제품 번호 활용 영역
B-hIL4RA mice 110052 C57BL/6
B-hIL1RAcP mice 110072 C57BL/6
B-hTNFa mice 110002 C57BL/6
B-hIL2 mice 110085 C57BL/6
B-hIL10 mice 110060 C57BL/6
B-hIL33 mice 110055 C57BL/6
B-hIL2RA mice 110066 C57BL/6
B-hIL1B mice 110075 C57BL/6
B-hIL17A mice 110053 C57BL/6
B-hIL4 mice 110064 C57BL/6
B-hIL6 mice 110050 C57BL/6
B-hIL2RG mice 110065 C57BL/6
B-hCSF1R mice 110035 C57BL/6
B-hIL2RB mice 110737 C57BL/6

이중 사이토카인 인간화 마우스

일반명 제품 번호 활용 영역
B-hTNFA/hIL17A mice 120548 C57BL/6
B-hIL23A/hIL12B mice 120553 C57BL/6
B-hIL4/IL4RA mice 120551 C57BL/6
B-hTNFA/hTNFR2 mice 120749 C57BL/6
B-hIL17A/IL17F mice 120554 C57BL/6
B-hIL6/hIL6R mice 120550 C57BL/6

삼중 사이토카인 인간화 마우스

일반명 제품 번호 활용 영역
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