CRISPR/EGE-based Gene Editing

저희의 혁신적인 유전자 편집 기술은 유전자 편집 효율을 10배에서 20배까지 향상시켜 연구를 위한 맞춤 모델 개발을 더 빠르고 경제적으로 만듭니다.

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    紹介
    극한 유전자 편집(EGE™)을 사용한 CRISPR 서비스

    CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)은 원래 세균에서 발견된 방어 메커니즘으로, 침입한 바이러스 DNA와 기타 외래 DNA를 분해하는 역할을 합니다. 현재 가장 일반적으로 사용되는 것은 Streptococcus pyogenes에서 유래한 CRISPR/Cas9 시스템입니다.

    CRISPR/Cas9 시스템의 생화학적 메커니즘은 무엇인가요?

    Cas9 단백질은 먼저 CRISPR RNA(crRNA)와 TRACER RNA(tracrRNA)와 결합하여 복합체를 형성한 후, 목표 서열에 결합하여 RNA-DNA 복합체를 형성합니다. 이 복합체는 궁극적으로 DNA에 이중 가닥 절단을 일으킵니다. crRNA는 목표 DNA 서열을 인식하고 tracrRNA는 Cas9 활성화에 필수적인 보존된 성분입니다.

    실험실에서 유전자 편집 절차를 간소화하기 위해, crRNA와 tracrRNA는 결합하여 단일 가이드 RNA(sgRNA)를 형성합니다. 목표 유전자는 sgRNA와 Cas9 단백질을 발현하는 플라스미드를 세포에 도입하여 편집할 수 있습니다. CRISPR/Cas9 기술은 세균, 효모, 식물, 어류, 포유류에서 성공적으로 사용되어 가장 효율적인 게놈 편집 기술입니다.

    왜 CRISPR/EGE™ 플랫폼을 선택해야 하나요? (CRISPR/EGE™ vs 표준 CRISPR/Cas9)

    최근 유전자 편집 서비스는 CRISPR/Cas9 기반 유전자 편집에 집중하고 있으며, 그 효율성과 다재다능성 덕분에 대부분의 상업적 유전자 타겟팅 서비스의 금 표준이 되고 있습니다. 표준 CRISPR/Cas9 서비스 기술을 사용할 경우, 외래 DNA와 목표 게놈 사이의 상동 재조합 효율이 매우 낮은 경우가 많다는 점을 읽으셨을 것입니다. 이는 사실입니다. 그러나:

    Biocytogen은 CRISPR/Cas9 유전자 타겟팅 플랫폼을 기반으로 한 혁신적인 극한 유전자 편집(EGE™) 시스템을 개발했습니다. EGE™는 사이트 특이적 유전자 편집을 통해 CRISPR/Cas9 단독에 비해 큰 DNA 조각을 삽입하는 효율이 최대 20배 높으며, 다양한 유형의 유전자 변형 마우스/랫트 및 세포 모델 생성에 최적입니다. 그 결과, EGE™는 유전자 변형 동물 모델 생성 시간을 단축시키며 Biocytogen의 유전자 편집 서비스 프로젝트에서 98%의 성공률을 자랑합니다.

    EGE™로 생성할 수 있는 유전자 변형 모델의 예로는, 전통적인 노크아웃/노크인, 조건부 노크아웃/노크인, 안전 항구 유전자 삽입, 인간화 등이 있습니다.

    CRISPR/EGE™와 ESC/HR 중 어느 것을 선택해야 하나요?

    Biocytogen에서는 85%의 마우스 및 100%의 랫트 유전자 편집 프로젝트가 EGE™ 기술로 생성됩니다. EGE™ 기술은 비교적 저렴하고 ESC 기반 프로젝트보다 빠른 턴어라운드 시간을 제공하지만, 노크인 크기가 18kb를 초과하는 프로젝트는 ESC/HR 기술을 사용해야 합니다.

    Biocytogen의 CRISPR/Cas9 기반 EGE™ 기술의 장점:
    High Speed The F0 generation positive mouse can be obtained in two months at the earliest, while the F1 generation can be obtained in five months
    Zero Risk Supported by a strong production platform, customers will be fully refunded if the project fails
    High Efficiency Compared with standard CRISPR/Cas9 technology, the efficiency of homologous recombination mediated by the EGE™ system is increased by 10-20 fold
    High Quality Southern blot screening minimizes follow-up experimental risks caused by random insertions
    Diversification Conventional knockout, conditional knockout, and gene knockin, etc.
    No Species Limitation Cell line, mouse, rat, pig, monkey, and zebra fish, etc.
    Biocytogen CRISPR/Cas9 기반 EGE 시스템 서비스 흐름:
    저희의 프로젝트는 항상 엄격한 품질 관리(QC)를 유지합니다

    Biocytogen에서는 전문가들이 품질 관리(QC)의 중요성을 깊이 이해하고 있으며, 그것이 프로젝트의 성공과 실패를 가르는 결정적인 요소임을 알고 있습니다. 저희의 엄격한 QC에 대해 더 알아보세요.

    남부 블롯을 통한 랜덤 삽입 스크리닝

    분석 결과에 따르면, CRISPR/Cas9 기반 EGE™ 프로젝트에서 32%가 랜덤 삽입(타겟 벡터 유래)을 발생시켰습니다. 이 삽입을 포함하는 동물 모델의 14%는 번식을 통해 제거할 수 없었으며, 가장 정밀하게 설계된 CRISPR 서비스도 이를 제거할 수 없었습니다. 남부 블롯 분석은 랜덤 삽입을 검출하는 금표준입니다. Biocytogen은 유???자 편집 동물 모델에서 랜덤 삽입이 없음을 확인하기 위해 남부 블롯 분석의 사용을 권장합니다.