HLA-A2.1/MAGEA1 특이적 TCR이 도입된 인간 T 세포는 표적 세포 살상 및 IFN-γ 생성을 유도
HLA-A2.1/MAGEA1 특이적 TCR이 도입된 인간 T 세포의 대부분은 MAGEA1-HLA-A2.1 양성 세포주인 A375, U2OS 및 U266B1에 대해 살상 활성을 나타내고 IFN-γ를 생성했습니다.
RenTCR™ 플랫폼 유래 TCR은 인간 공여자 유래 TCR보다 높은 펩타이드 민감도를 나타냅니다.
MAGEA1 펩타이드가 로딩된 T2 세포로 자극했을 때 TCR이 도입된 인간 T세포에서 생성되는 IFN-γ. 인간 공여자 유래 TCR에는 임상 개발 단계에 있거나 학술 문헌에 보고된 TCR이 포함됩니다. 데이터는 최대 IFN-γ 방출량을 기준으로 정규화했으며, 4매개변수 로지스틱 모델을 사용해 피팅했습니다.
후보 TCR에서 오프타깃 반응성이 관찰되지 않았습니다
(A) 돌연변이 유발 교차반응성(X-scan) 라이브러리의 펩타이드가 로딩된 T2 세포로 자극한 후 TCR-T 세포의 IFN-γ 생성을 측정했습니다. 히트맵은 인식 모티프(기준값: 상대적 IFN-γ 5%)를 나타내며, 이를 이용해 인간 프로테옴 데이터베이스를 스크리닝했습니다. (B) X-scan으로 확인되고 HLA-A*02:01 결합이 예측된 펩타이드만 추가 분석 대상으로 선정했습니다. 해당 펩타이드 풀(각 펩타이드 농도 10⁻⁶ M)이 로딩된 T2 세포로 TCR-T 세포를 자극하고 IFN-γ ELISA를 통해 인식 여부를 평가했습니다. (C) 인식된 오프타깃 펩타이드는 농도-반응 시험을 통해 검증했습니다. (D) 잠재적 오프타깃 단백질을 암호화하는 유전자를 과발현하는 종양 세포주와 TCR-T 세포를 공동 배양했습니다(E:T = 5:1, 18시간). (E) TCR-T 세포를 HLA-A*02:01⁺/MAGEA1⁻, HLA-A*02:01⁻/MAGEA1⁻ 또는 HLA-A*02:01⁻/MAGEA1⁺ 세포주와 18시간 동안 공동 배양했습니다(E:T = 1.5:1). 임상 개발 단계의 TCR 분자를 양성 대조군(pos ctrl)으로 사용했습니다. 각 실험의 IFN-γ 분비량은 ELISA로 정량했습니다.
HLA-A2.1/MAGEA1 특이적 TCR은 생체 내에서 종양 성장을 억제합니다
MAGEA1을 내인성으로 발현하는 인간 HLA-A*02:01 양성 종양 세포주 U266B1 및 NCI-H1703을 NDG 면역결핍 마우스에 이식했습니다. 종양 부피가 100 mm³에 도달했을 때 MAGEA1 특이적 TCR을 발현하는 T세포 또는 모의 처리(mock) T세포를 투여했습니다(그룹당 n = 마우스 6마리). S.C.: 피하 주사; I.V.: 정맥 주사; TIW: 주 3회.
