Biocytogen은 DSS 마우스 모델, TNBS 마우스 모델, T 세포 이식 IBD 마우스 모델을 개발했으며, 다양한 IBD 관련 타겟 인간화 마우스(예: B-hTL1A 마우스)를 개발하여 전임상 약물 평가용 완전한 데이터셋을 제공하고 있습니다.
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염증성 장 질환(IBD), 특히 궤양성 대장염(UC)과 크론병(CD)은 소화관에 영향을 미치는 만성 염증성 질환입니다. 임상 증상으로는 반복적인 설사, 복통, 장 출혈/혈변, 발열 및 체중 감소가 포함됩니다. 그 정확한 발병 메커니즘은 아직 명확하지 않지만, 유전적 요인, 면역 조절 이상, 환경 요인 및 장내 미생물군 등 여러 요인이 질병의 발병과 관련이 있다고 알려져 있습니다.
IBD의 메커니즘을 연구하고 치료 효과를 평가하기 위해, 연구자들은 전임상 IBD 마우스 모델을 주로 사용합니다. 가장 널리 사용되는 모델 중 하나는 화학적으로 유도된 DSS 대장염 모델입니다. DSS를 음용수로 투여하면 장 상피 장벽이 손상되고, 비특이적 면역 세포들이 사이토카인을 방출하여 점막의 완전성이 파괴됩니다. 이러한 변화는 마우스에서 체중 감소, 묽은 대변, 혈변 및 호중구 침윤과 같은 인간 궤양성 대장염과 유사한 임상적 및 병리학적 특성을 초래합니다.
바이오사이토젠(Biocytogen)은 C57BL/6 생쥐를 사용해 안정적이고 재현 가능한 DSS 유도성 IBD 생쥐 모델을 개발했습니다. 이를 통해 IBD 임상 전 연구 및 항염증 치료법의 약효 평가를 위한 신뢰할 수 있는 도구를 제공했습니다. 바이오사이토젠의 염증성 장 질환(IBD) 인간화 생쥐 모델(예: B-hTL1A 생쥐)은 완전한 인간 TL1A 단백질을 안정적으로 발현하며, 인간 IBD와 관련된 약물 개발을 위한 정밀한 임상 전 테스트 플랫폼을 제공합니다.
| Mice strains |
| B-hCXCR2 |
| B-hTL1A |
| B-hTL1A/IL23A/IL12B |
| Readout | ||
| Included tests | Clinical scores | Body weight |
| DAI score | ||
| Colon | Colon length | |
| Colon weight | ||
| Histopathology | H&E | |
| Optional tests | Tissue homogenate | Cytokines test |
| Tissue histopathology | IHC | |
IBD 마우스 모델에서 CsA(사이클로스포린 A)의 효과 검증. C57BL/6 마우스는 연속적으로 7일 동안 DSS를 포함한 음료수를 마시고, 그 동안 체중 변화를 기록하며, 연구 종료 시 임상 점수(A-D)를 기록하고 결장 무게와 길이를 기록했습니다. 이원 ANOVA(A-D) 또는 일원 ANOVA(E-F)를 사용하여 다중 비교를 실시했습니다. 결과는 평균값 ± 표준오차로 표시되며, ****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05.
DSS 유도 대장염의 IBD 마우스 모델에서 조직학적 평가. 조직 병리 점수와 H&E 염색의 광학 현미경 사진(10배 및 40배 확대). 결과는 평균값 ± 표준오차로 표시되며, ****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05.
항IL12/23p40이 DSS 유도 급성 대장염에 미치는 영향.
C57BL/6 마우스는 3% DSS를 포함한 음료수를 5일간 마시고, 0일부터 7일까지 매일 CsA를 주사하고, 2, 6, 8일에 항IL12/23P40을 주사했습니다(A). 매일 체중과 배설물(B, C)을 기록하고, 최종적으로 결장을 수집하여 H&E 염색을 실시하고, 결장 길이(D)와 무게(E)를 기록했습니다. CsA와 항IL12/23P40은 3% DSS 유도 궤양성 대장염을 완화했습니다. 이 실험은 이원 ANOVA와 다중 비교를 사용했습니다. 결과는 평균값 ± 표준오차로 표시되며, ****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05.
IBD(B-hCXCR2 마우스) 마우스 모델에서 효과 검증.
C57BL/6 마우스와 B-hCXCR2 마우스는 7일간 연속으로 DSS를 포함한 음료수를 마시고, 그 후 정상 음료수로 복귀했습니다. 이 기간 동안 체중 변화와 임상 점수(체중 감소 점수, 대변 경도 점수, 대변 혈액 점수, 총 DAI 점수)를 기록했습니다. 이원 ANOVA와 다중 비교를 사용하여 모든 그룹을 G3 그룹과 비교했습니다. 결과는 평균값 ± 표준오차로 표시되며, ****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05.
IBD 마우스 모델의 결장 샘플링, 결장 평가 및 조직학적 평가. C57BL/6 마우스와 B-hCXCR2 마우스는 7일간 DSS를 포함한 음료수를 마시고, 그 후 정상 음료수로 복귀했습니다. 연구 종료 시 결장 길이(A)와 결장 무게(B)를 측정하고, 결장 조직은 H&E 염색을 위해 수집되었습니다(C). 일원 ANOVA와 다중 비교를 사용하여 모든 그룹을 G3 그룹과 비교했습니다. 결과는 평균값 ± 표준오차로 표시되었습니다.
C57BL/6 마우스와 B-hTL1A/IL23A/IL12B 마우스는 다른 농도의 DSS가 포함된 물을 7일간 연속으로 섭취했습니다. 체중 변화와 임상 점수(체중 감소 점수, 대변 경도 점수, 대변 내 혈액 점수, 총 DAI 점수)를 기록했습니다. 이원 ANOVA와 다중 비교를 사용하여 모든 그룹을 G1 그룹과 비교했습니다. 데이터는 평균 ± SEM으로 나타냅니다. ****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05.
C57BL/6 마우스와 TL1A/IL23A/IL12B 인간화 마우스(B-hTL1A/IL23A/IL12B 마우스)는 다른 농도의 DSS가 포함된 물을 7일간 연속으로 섭취했습니다. 실험 종료 시 대장 길이와 대장 무게를 측정하고 대장 조직을 H&E 염색했습니다. 일원 ANOVA와 다중 비교를 사용하여 G1 그룹과 비교했습니다. 데이터는 평균 ± SEM으로 나타냅니다. ****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05.
| Mice strains |
| B-hTL1A |
| Readout | ||
| Included tests | Clinical scores | Body weight |
| DAI score | ||
| Colon | Colon length | |
| Colon weight | ||
| Histopathology | HE | |
| Sirius Red staining | ||
| Optional tests | Tissue homogenate | Cytokines test |
| Tissue histopathology | IHC | |
DSS 유도 만성 대장염. 마우스는 DSS 4 주기를 반복적으로 노출시켰습니다. 각 주기는 2% DSS로 5일 처리한 후 2일 간 물 처리했습니다(A). 체중, 대장 무게 및 대장 길이를 기록했습니다(B). H&E(C) 및 Sirius Red(D)로 조직 병리학적 염색을 했습니다. 대장을 수집하여 조직학적 분석을 수행했습니다. DSS를 받은 마우스는 물을 받은 마우스에 비해 체중이 낮고 대장 무게는 높으며 대장 길이가 짧았습니다. 다중 T 검정을 사용했습니다. 평균 ± SEM, n=5, ****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05.
| Mice strains |
| B-hTL1A |
| Readout | ||
| Included tests | Clinical scores | Body weight |
| Colon | Colon length | |
| Colon weight | ||
| Histopathology | HE | |
| Optional tests | Tissue homogenate | Cytokines test |
| Tissue histopathology | IHC | |
CD4-GK1.5-mlgG2a가 TNBS 유도 급성 장 염증에 미치는 영향. 동물은 0일에 TNBS 용액으로 피부를 긁어 과민반응을 유도한 후 7일에 TNBS를 직장으로 투여했습니다. 매일 체중(A)과 체중 변화(B)를 기록하고 6일째에 CD4-GK1.5-mlgG2a(3, 10 mg/kg, i.p.)를 투여했습니다. 마우스는 10일째에 희생되었으며 대장 길이(C)와 대장 무게(D)를 기록했습니다. 이원 ANOVA 또는 일원 ANOVA와 Dunnett 다중 비교를 사용하여 각 그룹을 상호 비교했습니다. 데??터는 평균 ± SEM으로 나타냅니다. ****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05.
PF06480605가 TNBS 유도 급성 IBD에서 B-hTL1A 마우스에서의 효능. 동물은 0일에 TNBS를 직장으로 투여했습니다. TA 투여 시 -1일, 2일, 5일에 각각 10 또는 25 mg/kg의 PF06480605를 투여했습니다. 계획 도식(A). 생존률(B)을 계산하고 매일 체중(C-D)을 기록했습니다. 이원 ANOVA와 Dunnett 다중 비교를 사용하여 각 그룹을 G2 그룹과 비교했습니다. 데이터는 평균 ± SEM으로 나타냅니다. ****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05.
동물은 0일에 TNBS를 직장으로 투여했습니다. 매일 체중을 기록하고 생존률을 계산했습니다. TA 투여 시 -1일, 2일, 5일에 각각 10 또는 25 mg/kg의 PF06480605를 투여했습니다. 7일째에 마우스는 희생되었으며 대장 무게(A)와 대장 길이(B)를 기록했습니다. 이후 대장 조직을 H&E 염색했습니다. 일원 ANOVA와 다중 비교를 사용하여 모든 그룹을 G2 그룹과 비교했습니다. 데이터는 평균 ± SEM으로 나타냅니다. ****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05.
| Mice strains |
| B-hPSGL1(spleen donor) |
| Readout | ||
| Included tests | Clinical scores | Body weight |
| DAI score | ||
| Colon | Colon length | |
| Colon weight | ||
| Histopathology | H&E | |
| Optional tests | Tissue homogenate | Cytokines test |
| Tissue histopathology | IHC | |
| Histopathology | Sirius Red staining | |
이식 T 세포 유도 IBD 모델에서의 효능.
Balb/c 마우스의 비장으로부터 CD4+CD25- T 세포 또는 CD4+ T 세포를 상용 키트를 사용해 분리했습니다. G2 그룹의 동물은 3×105 CD4+ T 세포를 주입하고, G3-G5 그룹의 동물은 동일한 수의 CD4+CD25- T 세포를 주입했습니다. 치료는 G4 그룹에 매주 10 mg/kg의 항TNFα를, G5 그룹에 매주 10 mg/kg의 항CD4를 주입했습니다. 이원 ANOVA 또는 일원 ANOVA와 다중 비교를 사용하여 각 그룹을 G3 그룹과 비교했습니다. 데이터는 평균 ± SEM으로 나타냅니다. ****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05.
