Orthotopic Liver Cancer Model

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직장 간암 모델: B-luc Hep 3B B-NDG 마우스에서

Study ID:	Groups	Animal strain	Sex	Cell line	The amount of cells Inoculated	The Volume of cells	Animal number	Remarks
TT02110	-	B-NDG mice	F	B-luc Hep 3B #1-A06	5×10⁵	0.02ml/mice	10	-

B-luc Hep 3B (plus) + B-NDG mice (orthotopic) img

간암 오르소토픽 모델의 구축.
간암 모델을 구축하기 위해 20μL의 B-luc Hep 3B 세포 현탁액(세포 수 5×10⁵개)을 B-NDG 마우스(암컷, n=10)의 간 왼쪽 외엽에 주입하였다. 매주 마우스의 체중 및 종양 형광 신호를 기록한 결과, 시간이 지남에 따라 형광 신호는 점차 증강되고 체중은 약간 감소하는 경향을 나타냈다. 이를 통해 해당 세포주를 이용한 간암 오르소토픽 종양 모델이 성공적으로 구축되었음을 확인할 수 있었다.

직장 간암 모델의 Micro-CT 영상

B-luc Hep 3B (plus) + B-NDG mice (orthotopic) img 2

마이크로CT를 이용한 간암 오르소토픽 모델의 영상학적 분석.
영상 결과에 따르면, 조영제 투여 후 마우스 간 조직은 밀도가 증가하여 영상에서 고밀도(짙은 갈색) 음영으로 나타났으며, 종양 조직은 조영제를 거의 흡수하지 않아 저밀도 음영으로 관찰되었다。A：B-NDG 마우스에 B-Luc-Hep 3B 세포를 이식하여 제작한 간암 오르소토픽 모델에 대해, 이식 후 14일차에 마이크로CT 스캔을 수행하였다. 영상은 마우스 복부의 관상면으로, 시간이 경과함에 따라 간 영역의 저밀도 음영(종양 조직) 부피가 점차 증가하는 것을 확인할 수 있었다。B：조영증강CT 스캔 데이터를 기반으로 작성한 종양 성장 곡선。C：B-Luc-Hep 3B 간암 오르소토픽 모델 마우스의 체중 변화 추이.

직장 간암 모델의 효능 평가

Study ID:	Groups	Animal number	Treatment	Dosage（mg/kg）	Lot No.	Dosing Volume	Dosing Route	Treatment Schedule	Treatment Times
21P079544	G1	6	0.9% saline solution	-	2106261604	10μL/g	i.p.	QW	4
21P079544	G2	6	fluorouracil	60mg/kg	2110151	10μL/g	i.p.	QW	4

B-luc Hep 3B (plus) + B-NDG mice (orthotopic) img 3

간암 오르소토픽 모델의 약효 평가. B-NDG hIL-15 마우스(암컷, n=10)에 20μL의 세포 현탁액(세포 수 5×10⁵개)을 이식하였다. 종양 이식 후 5일차에 이미징 값을 기준으로 마우스를 0.9% 생리식염수군과 플루오로우라실군으로 무작위 분류하였다. 매주 마우스의 체중 및 종양 형광 신호를 기록한 결과, 60mg/kg 용량의 플루오로우라실은 B-luc Hep 3B 간암 오르소토픽 이식 종양의 성장을 현저히 억제하여, 본 모델이 전임상 약효 평가에 잘 활용될 수 있음을 입증하였다. 실험 종료 후 마우스를 해부한 결과, 헤마톡실린-에오신(H&E) 염색에서 종양이 췌장, 위 및 비장으로 전이된 것을 확인할 수 있었다.

직장 간암 면역 재구성 모델의 효능 평가

Study ID:	Groups	Animal number	Treatment	Dosage（mg/kg）	Lot No.	Dosing Volume	Dosing Route	Treatment Schedule	Treatment Times
22P122201	G1	6	PBS	-	2428708	5μL/g	i.v.	QW	4
22P122201	G2	6	Positive control	0.5mg/kg	2022105025	5μL/g	i.p.	Q2D	10

간암 오르소토픽 면역 재구성 모델의 약효 평가. B-NDG 마우스에 인간 말초혈 단핵구(PBMC, 5×10⁵개/0.2mL/마리)를 정맥 내 투여한 후, 4일차에 마우스 간에 20μL의 B-luc Hep 3B 세포 현탁액(5×10⁶개/0.02mL/마리)을 이식하였다. 실험 0일차에 평균 이미징 신호 값 및 인간 CD45 양성 세포 비율(hCD45%)을 기준으로 마우스를 무작위로 2군으로 분류하고, 매주 마우스의 체중 및 종양 형광 신호를 기록하였다. 실험 결과, 양성 대조 약물은 면역 재구성 후 간암 오르소토픽 이식 종양의 성장을 현저히 억제했으며, 마우스 체중은 시간이 지남에 따라 약간만 감소하여 본 모델이 전임상 약효 평가에 잘 활용될 수 있음을 입증하였다.

직장 간암 모델: B-Tg(Luc-EGFP) Hep G2 B-NDG 마우스에서

Evaluation of the efficacy of orthotopic liver immune reconstitution model 2

직장 간암 모델의 구축.
간암 모델을 구축하기 위해 B-Tg(Luc-EGFP) Hep G2 세포 현탁액을 B-NDG 마우스의 왼쪽 측면 간엽에 주입하고, 마우스의 체중과 종양 형광 신호를 매주 기록하였다. 결과는 형광 신호가 점차 증가하는 것을 보여주었으며, 오른쪽 패널은 간 종양의 H&E 염색 결과를 보여준다. 이는 세포주가 성공적으로 원위 종양 모델로 구축되었음을 나타낸다.

Evaluation of the efficacy of orthotopic liver immune reconstitution model 3

간 전이 모델의 구축. 간 전이 모델을 구축하기 위해 100μL B-hPD-L1 MC38 세포 현탁액 (5×10⁵, 1×10⁶)을 B-NDG 마우스의 비장에 주입하고, 마우스의 체중과 종양 형광 신호를 매주 기록하였다. 결과는 형광 신호가 점차 증가하는 것을 보여주었다. 이는 세포주가 간 전이 모델로 성공적으로 구축되었음을 나타낸다.

Study ID:	Groups	Animal number	Treatment	Dosage (mg/kg)	Lot No.	Dosing Volume	Dosing Route	Treatment Schedule	Treatment Times
24P071531	G1	6	PBS	-	2933643	10μL/g	i.v.	QW	2
	G2	6	DS-8201	3mpk	394042	10μL/g	i.v.	QW	2
	G3	6	DS-8201	6mpk	394042	10μL/g	i.v.	QW	2

DS-8201은 B-NDG 마우스에서 B-Tg (Luc-EGFP) Hep G2 종양의 성장을 현저히 억제하였다. Hep G2 세포(5×10⁵개)를 매트리겔과 1:1 비율로 혼합한 후, 암컷 B-NDG 마우스(8주령, n=6)에 오르소토픽 이식을 실시하였다. 이미징 신호 값이 약 2.7×10⁸ 포톤/초에 도달한 시점에서 투여를 시작하며, 투여 계획은 상단 그림을 참조한다. 실험 데이터는 평균값±표준오차로 나타낸다.

Orthotopic Liver Cancer Model

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